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2024技術要點:ELISA實驗之包被原?

點擊次數:3375   發布時間:2024/3/28 10:15:28

在ELISA檢測系統的關鍵要素中,包被原的性質很重要,蛋白濃度,是否降解,這關系到你做出的抗體可不可以被其識別,所以保留抗原很重要,elisa試劑盒我做重組蛋白時,一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。封鎖就是讓大量不相關的蛋白質充填這些曠地空閑,從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質的再吸附。但有時因為試驗的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。

操作注意:
(1) 試劑盒保存在2-8℃,使用室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正,F象,水浴加熱使結晶解后再使用。
(2) 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
(3) 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
(4) 所有液體組分使用充分搖勻。 
    
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。該法適于測定細胞培養上清、血清、血漿及組織液中的樣本,干擾小可以測到每毫升納克水平的細胞因子(或受體)的水平。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體;
②酶標記的抗原或抗體;
③酶作用的底物。
  
根據ELISA試劑盒試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(1) 雙抗體夾心法;
(2) 雙位點一步法;
(3) 間接法測抗體;
(4) 競爭法;
(5) 捕獲法測IgM抗體;
(6) 應用親和素和生物素。
   
試劑盒普遍用作非放射性同位素的成鍵化驗。在這種方法中,通常標準配體是固定的,通過加入溶液相受體或蛋白質來使之成鍵。通過加入與受體特異性反應的抗體來定量成鍵的受體,而且初抗體的量以加入第二種能顯色的抗體測量。第二種抗體能識別抗體的末端,在其末端的堿性磷酸酯或過氧化物酶等與酶發生反應,從而使溶液顯色。

更多實驗資訊可咨詢我司業務員。上海恒遠生物科技有限公司擁有自己的實驗室,備有業的技術研發團隊,于各種生物試劑,細胞,血清,ELISA試劑盒的研發與銷售,實驗提供免費代測服務,并提供精湛的技術服務,如果您有實驗上的問題歡迎來咨詢,為您提供業的一對一技術指導。
 

原創作者:上海恒遠生物科技有限公司

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